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            對 PCR實驗室布局和通風系統設計的探討

            文章作者:admin 發布時間:2021-05-25 13:41:18 瀏覽次數:0
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              PCR實驗室又稱基因擴增實驗室。聚合酶是聚合酶鏈反應的簡稱。這種分子生物技術可以擴增特定 DNA,并被認為是體外特異性 DNA復制。該方法具有靈敏度高,特異性強,快速,簡便等優勢。該技術能將傳統方法難以檢測到的少數病毒的 DNA擴增100多萬倍,大大提高疾病的診斷水平。該技術既可用于基礎研究,如基因分離、克隆和核酸序列分析,又可用于疾病診斷或任何含有 DNA和 RNA的地方,也稱為無細胞分子克隆或 DNA序列特異性體外引物定向酶促擴增技術。

              1.聚合酶鏈反應實驗室布置

              聚合酶鏈反應擴增實驗室原則上分為三個獨立的工作區域:試劑儲藏和制備區域,樣品制備區域,擴增和擴增產物分析區域。為避免交叉污染,進入每個工作區必須嚴格遵循一個方向,即只可從試劑貯存和制備區域到樣品制備區域再到擴增和擴增產物分析區域。試驗室與試樣之間的轉移應通過轉移窗口進行。

              2.PCR實驗室實驗室空氣調節通風系統和壓力控制的設計

              聚合酶鏈反應實驗室對純化水平沒有嚴格要求,但為避免試驗室間交叉污染的可能性,建議采用完全輸送和完全排放的氣流組織形式。與此同時,應嚴格控制送排風比例,確保各實驗區的壓力要求。

            pcr實驗室

              (1)試劑的存放和準備區域

              本實驗室的主要工作是:貯存試劑的制備,試劑的分裝,主反應混合物的制備。試樣制備所用的試劑和材料應直接運送至本地區,不能通過其他地區。配料試劑存放在本區域,所需的試劑在本區域備好。為控制氣壓,該區域對外界保持輕微的正壓力。

              (2)標本準備區

              在 PCR實驗室的主要工作是樣品保存,核酸(RNA和 DNA)的提取和存儲,擴大反應管的加入, DNA合成的檢測等。為了避免氣溶膠污染從鄰近區域進入,要求該區域的壓力梯度相對于鄰近區域為正數。另外,采樣工作中可能會產生氣溶膠污染,因此應該避免在采樣區域內不必要的行走。

              (3)產物擴增和分析區

              本課題主要研究 DNA擴增及擴增片段的檢測。另外,還可在該區域添加已制備的 DNA模板(從樣品制備區),并將主反應混合物制備到反應混合物中(從試劑儲存和制備區)。為了避免氣溶膠泄漏, PCR實驗室區域的壓力梯度必須與附近區域的負壓相對應。


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